首页 >>>
技术文章 >>> 半抗原偶联试剂盒实验时需要留神哪些事项
半抗原偶联试剂盒实验时需要留神哪些事项
更新时间:2019-03-27 点击次数:1059次
为了成功的操作半抗原偶联试剂盒,需要在确立稳健的多色配色方案,确定正确对照和进行重复性好的分析上花费大量的时间和精力。除了资源共享实验室和核心设备花费大量的时间在仪器质量控制上,研究人员也会把质量控制结合进他们的实验中。质量控制管能实现确保实验之间的PMT电压一致,能确保实验正确进行并且能确保设门策略具有说服力。
洗板时容易造成误差:因为洗板是人工洗的,所以判断什么时候洗干净了也是人为判断的,这个时候带有主观色彩,所以多清洗几次,还有就是在洗的时候孔与孔之间的液体容易交叉流动;
半抗原偶联试剂盒实验时,留神事项如下:
1.正式实验时,应分别以阳性对照与阴性对照操控实验条件,待检样品应作一式二份,以确保实验效果的准确性。有时本底较高,说明有非特异性反应,可选用羊血清、兔血清或BSA等关闭。
2.在半抗原偶联试剂盒中,进行各项实验条件的挑选是很重要的,其间包含:
(1)固相载体的挑选:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其方式可所以凹孔平板、试管、珠粒等。现在常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在运用前均可进行挑选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,查询其显色反应是否均一性,据此判明其吸附功用是否出色。
(2)包被抗体(或抗原)的挑选:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时刻及其蛋白量也有必定影响,一般多选用4℃18~24小时。蛋白质包被的适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,半抗原偶联试剂盒在其它实验条件相一起,查询阳性标本的OD值。挑选OD值大而蛋白量少的浓度。关于大都蛋白质来说一般为1~10μg/ml。