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人抗平滑肌抗体ELISA试剂盒样本处理及要求说明

更新时间:2019-12-23   点击次数:855次
 
  
  人抗平滑肌抗体(ASMA)是以机体平滑肌组织为抗原的一种自身抗体,无器官及种属特异性,主要为IgG和IgM类型。鼠肝、肾、人甲状腺和血小板等组织与平滑肌的肌动球蛋白具有共同的抗原性。因此用纯化的肌浆球蛋白为抗原可进行沉淀试验、间接血凝试验、放射免疫测定和酶免疫技术检测SMA。但目前zui常用的是以平滑肌为抗原片的间接免疫荧光法。
  
  人抗平滑肌抗体(ASMA)是抗肌动球蛋白的自身抗体。一般采用IFA法,以大鼠胃作为抗原基质,阳性可见胃壁平滑肌呈现亮绿色荧光。ASMA是自身免疫性肝炎的血清学标志抗体医学教育|网搜集整理。在其他肝病例如肝外胆汁淤滞、药物诱发性肝病、急性病毒性肝炎以及肝癌患者中检出率很低。其他疾病如传染性单核细胞增多症、SS、RA、支原体肺炎、肿瘤和病毒感染者也有不同程度的阳性率。正常人中仅有2%阳性。
  
  人抗平滑肌抗体(ASMA)ELISA试剂盒样本处理及要求:
  
  1.血清:将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过一夜,然后1000×g离心20分钟,取上清即可,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
  
  2.血浆:用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃1000×g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
  
  3.组织匀浆:用预冷的PBS(0.01M,pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。*后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。
  
  4.细胞培养物上清或其它生物标本:请1000×g离心20分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。

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