欢迎来到南京卡米洛生物工程有限公司网站!
技术文章
首页 >>> 技术文章 >>> 标准胎牛血清严格的制备流程,请放心使用

标准胎牛血清严格的制备流程,请放心使用

更新时间:2021-03-29   点击次数:1139次
  *:标准胎牛血清主要运用于细胞的培养,在这个过程中zui为重要的就是保证培养不受污染,有时候需要一定的灭活处理。在对胎牛血清灭活这个问题中很多人存在不同的见解。
 
  热灭活目的是为了去除血清中补体等对热敏感的物质,在对补体灭活以外,还可去除血清中的支原体的污染。常规灭活建议的温度在45℃到62℃之间,而时间则从15分钟到60分钟不等,其中*常用的就是56℃热处理30分钟。现在好像不主张热灭活,热灭活经常给血清产品带来负面影响,对血清的加热经常导致血清中沉淀的产生,此外,有研究结果证实热灭活步骤减弱了标准胎牛血清和小牛血清对细胞的促粘附作用。
 
  标准胎牛血清的制备流程非常严格,放心使用
 
  1、血清来源:可从世界各国收集胎牛血清,但是必须符合他的质量标准。地方当局还不清楚本地是否有牛海绵状病毒流行的血清不收集,有说明血清质量的证明资料:包括收集过程的全部资料、检验结果和交付情况。
 
  2、血清的收集:是心脏穿刺取血,新生牛(10~14天)和小牛(10个月内)血清静脉取血。血清采集条件必须符合工业生产的标准:低温下采集、一次分离、分离后立即混合冻存。符合要求的血清56℃水浴30分钟灭活。
 
  3、血清的制备:
 
  a.超低IgG:通过亲和层析工艺去除胎牛血清中的γ球蛋白,使FBSγ球蛋白含量减到zui低,一般IgG≤5ug/ml,生物学活性不变。
 
  b.血清透析:用12000~14000分子量的透析膜在0.15M NaCl中透析直到使葡萄糖含量<0.5mg/ml(用葡萄糖氧化酶/过氧化酶方法测定)。
 
  c.γ-射线照射:已经证明γ-射线照射可以有效灭活血清中可能污染的病毒、支原体。照射剂量为30~45KG。而且这个剂量的γ-射线照射不会改变血清的理化性质和对细胞培养的影响。
 
  4、除菌过滤:经过上述处理的粗制血清再经过一系列除菌滤膜过滤包括0.2微米(micron)和0.1微米滤膜。FBS要通过三层0.1微米滤膜,其他血清可通过0.2微米滤膜。
 
  标准胎牛血清优势:
 
  1.指标好,内毒素低,利于细胞的生长,不会导致细胞过早的凋亡,有利于下游产物的纯化。
 
  2.血清种类齐全,可以满足所有血清用户的需求。
 
  3.多种血清都提供了热灭活的包装,减少了实验室自行热灭活的工作,并降低了热灭活对血清的负面影响。
 
  4.胚胎干细胞血清及TET系统血清都经过相关实验严格筛选及验证,质量安全。

版权所有© 2018 南京卡米洛生物工程有限公司