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细说一下标准胎牛血清解冻有哪些注意事项
更新时间:2022-06-22 点击次数:872次
标准胎牛血清用作真核细胞体外细胞培养的生长补充剂。动物血清(牛血清和其它动物血清)都用于细胞培养,其中使用*泛的是标准胎牛血清。FBS含有生长因子和极低水平的抗体,因此在许多不同的细胞培养应用中具有多功能性。在FBS中发现了1000多种成分,包括蛋白质,电解质,脂质,碳水化合物,激素,酶和其他不确定的成分,这些成分在许多培养条件下对于支持细胞生长都是必需的。
标准胎牛血清是新鲜的胎牛全血,通过剖腹产对胎牛心脏进行闭式穿刺获得。在自然层析和离心后,收集得到淡黄色透明上清液,去除血细胞、纤维蛋白和其他成分。生产完成后,采用多级高压膜过滤技术和三级0.1µm末端微滤法进行处理。它通常用于细胞培养相关的实验。那么,如何储存和解冻胎牛血清才不会使产品质量受损?
未拆封的血清,一般情况下应存放于-10℃至-20℃,在产品规定的效期内均可使用,若一次无法用完一瓶,建议无菌分装血清至合适大小的无菌离心管内,再放回冷冻。
将血清从冷冻冰箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室温下使之全融,或通过水浴锅促使其溶解。但必须注意的是,融解过程中必须规则地摇晃均匀。*溶解后建议尽快使用,若长时间储存在2-8℃,血清中的各种(脂)蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)可能因凝集而形成沉淀或可见的混浊。
解冻标准胎牛血清时,请按照所建议的逐步解冻法(-20℃至4℃至室温),若解冻时改变的温度太大(如-20℃至37℃),实验显示非常容易产生沉淀物。解冻胎牛血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生。请勿将胎牛血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,胎牛血清会变得混浊,同时胎牛血清中许多较不稳定的成分也会因此受到损害,而影响胎牛血清的质量。胎牛血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以无须做此步骤。若必须做胎牛血清的热灭活,请遵守56℃,30分钟的原则,并且随时摇晃均匀。