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关于人胎盘生长因子(PLGF)检测试剂盒实验的问题解答

更新时间:2019-11-18   点击次数:1502次
 
  
  人胎盘生长因子(PLGF)elisa试剂盒是采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(elisa)。往预先包被人胎盘生长因子(PLGF)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并*洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的人胎盘生长因子(PLGF)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
  
  人胎盘生长因子(PLGF)检测试剂盒实验中遇到的问题解答
  
  一、洗板
  
  也许因素:
  
  1)选用手艺洗板,孔与孔之间液体穿插。
  
  2)选用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,致使洗板不*;洗板针阻塞,抽吸不*;洗板不畅,致使洗板作用差。
  
  3)反响板过多形成洗板等待时刻长。
  
  解决办法:
  
  1)确保洗液注满各孔,洗板针疏通,洗完板后在吸水纸(挑选洁净、无或少尘的吸水资料)上轻轻拍干;
  
  2)合理安排,或多用几台洗板机。
  
  二、显色
  
  ELISA试剂盒也许因素:
  
  1)显色剂制造后放置时刻过长或运用过期显色剂;
  
  2)加显色剂时溅起孔外形成液体回流。
  
  解决办法:
  
  1)显色剂尽量在临用前制造,坚持不必过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不必;
  
  2)加样时坚持显色剂不外流;
  
  3)A、B液应防止触摸金属器械。
  
  三、停止
  
  也许因素如加停止液时发生较多气泡,致使假阳性添加。所以在加停止液时应防止发生气泡。
  
  四、读板
  
  ELISA试剂盒如读板时板底不清洗等。应确保酶标板清洗。所以在全部操作过程中确保酶标板不触摸次氯酸;尽也许完成ELISA检查规范自动化,有用进步检查质量。
  
  

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